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PCR实验室污染的核心问题
2019/07/04 08:38
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【摘要】：
PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。自1985年PCR技术问世以来，由于其具有高灵敏度、特异性、快速、简单等优点，能将传统方法难以检测的极少数病毒DNA片段扩增百万倍以上，从而大大提高疫病的诊断水平，该项技术被兽医实验室广泛的应用于病原学检测工作中。
随着社会的进步和科学技术的发展，现在很多市、县级兽医实验室进行了仪器设备的更新和先进人才的引进，基本都具备了分子生物学病原检测能力，为基层兽医组织提供了疫病诊断、防控新手段。同时，我们也要看到因PCR实验室布局不合理、人员培训不到位等方面制约了其病原检测的准确性。由于PCR技术的高度敏感性，因此PCR技术要求高、影响因素多(特别是RNA标本)，从样品制备到结果的产生，任何一处细微的失误均会造成结果的偏差，导致样品的假阳性和假阴性结果。现结合有关资料和工作经验，对PCR实验室的污染及控制策略进行相关阐述，供同行参考。
PCR实验室的核心问题是如何避免污染。在实际工作中，常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染；天然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染，实验须停止，直到找到污染源为止，而且实验结果须作废，需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐，浪费人力物力。因此要避免污染，首先应是预防，而不是排除。
关键词：
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PCR实验室工作区域的严格划分
PCR实验室仪器设备的校准及保养维护
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