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PCR实验室的主要功能和设备配置

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PCR实验室的主要功能和设备配置

2019/06/19 08:45
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【摘要】:
PCR实验室试剂储存和准备区
该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。
 
(1)PCR实验室试剂储存和准备区
该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。
 
(2)PCR实验室标本制备区
该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。
 
本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。对具有潜在传染危险性的材料,在生物安全柜内开盖,并有明确的样本处理和灭活程序。
 
(3)PCR实验室扩增反应混合物配制和扩增区
该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中,通常在一轮扩增后须打开反应管,因此,巢式扩增有较高的污染危险性,二次加样须在本区内进行。
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