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PCR实验室核酸扩增的管理与质控

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PCR实验室核酸扩增的管理与质控

2019/06/12 08:50
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【摘要】:
PCR实验室人员严格按照相应的SOP进行上机操作,PCR运行程序不得随意更改。在仪器制造商指导配合下每月一次认真检查基因扩增仪温度的准确性、分布均一性和达到某一温度所用时间,认真做好校验工作并贴好校准标签、注明已做过校准的日期及下次校准的日期,以确保所用仪器的稳定性。
 
PCR实验室人员严格按照相应的SOP进行上机操作,PCR运行程序不得随意更改。在仪器制造商指导配合下每月一次认真检查基因扩增仪温度的准确性、分布均一性和达到某一温度所用时间,认真做好校验工作并贴好校准标签、注明已做过校准的日期及下次校准的日期,以确保所用仪器的稳定性。
 
同时建立包括生产厂家、型号、序列号、目前放置地点、购置日期、维修记录等技术资料在内的仪器档案。对扩增检测所用到的引物,不论是商品化试剂盒配套或自行设计都应充分了解相关信息,防止因引物设计不当而造成检测失败。在每批检测中都应设置阴性、阳性对照,加设弱阳性对照,因为其不但可检测扩增反应液的质量,还可知道相关PCR试剂的检测灵敏度和特异性。而有些商品化试剂盒中只提供试剂质控对照。对此,PCR实验室用样本替代,以保证检验结果的稳定性。这些样本须是按SOP重复3次检测后获得相同的结果才被采用。检测时,阴性、阳性对照样品和待测样本同时进入实验过程,以保证检测结果的准确性。操作结束后及时对实验室台面进行清洁和消毒,并作好记录。
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