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PCR实验室样本的制备管理与质控

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PCR实验室样本的制备管理与质控

2019/06/05 08:46
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【摘要】:

样本制备即核酸的提取纯化,其质量的好坏对PCR的影响很大。操作过程中尽量避免频繁的走动,所有与样本接触的器具如吸头、离心管,加样器等使用前须经过相应的消毒处理。
 
样本制备即核酸的提取纯化,其质量的好坏对PCR的影响很大。操作过程中尽量避免频繁的走动,所有与样本接触的器具如吸头、离心管,加样器等使用前须经过相应的消毒处理。
 
实验人员操作时手法及程序应规范正确,如Taq酶、dNTP、引物等试剂在开盖使用前应1000r/min离心10s,使黏附在管壁和管盖内的液体沉于管底、以保证试剂浓度的准确性。
 
吸取不同试剂时须更换加样吸头、以防交叉污染。操作不能剧烈,避免加样过程中可能会发生气溶胶所致的污染以及高分子量基因组DNA的提取质量受到影响。建议使用有国家正式批准文号的配套试剂盒及经国家有关部门注册登记过的仪器,如高速离心机、水浴锅和电子天平等。
 
对因检测需要而自行选用的试剂进行预实验,证明其不影响检测结果的准确性和可靠性后再用于样本的提取。对不同类型样本的制备及核酸扩增检测制定相应的标准操作程序,具体内容有:检测项目、检测目的、检测原理、样本类型、样本量、提纯方法、提纯程序步骤,试剂仪器包括生产商、供应商、有效期、贮存条件、性能参数。提纯后的核酸模板在样本制备区的生物安全柜内加入PCR反应混合液。
 
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