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PCR实验室污染的预防

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PCR实验室污染的预防

2019/05/30 08:44
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【摘要】:
PCR实验室严格分区
整个检测过程应严格分区进行:PCR反应体系的配置区,标本处理、加样区,PCR扩增、荧光检测及结果分析区。各区使用的仪器、设备、耗材和工作服应独立专用。
 
1.PCR实验室严格分区
整个检测过程应严格分区进行:PCR反应体系的配置区,标本处理、加样区,PCR扩增、荧光检测及结果分析区。各区使用的仪器、设备、耗材和工作服应独立专用。
 
2.进行PCR操作时,工作人员应该严格遵守SOP操作规程
操作人员应经过专业培训,具有一定经验和操作技能。
 
3.分装PCR试剂
当使用的 PCR 试剂盒,不是独立分装的反应液时,应将PCR反应液先配置好,然后分装到反应管-20℃保存,以减少重复加样次数,避免污染。PCR试剂、PCR反应液与样品及PCR产物分开保存,试剂盒里面的阳性对照、阳性参考品也应该与试剂分开放置,不应放于同一冰箱。
 
4.正确使用加样器
吸样时要特别小心,应缓慢匀速,避免液体溅到加样器头上。尽量一次性吸完,忌反复多次抽吸,以免交叉污染或产生气溶胶。打出液体后拇指不应松开按钮,将吸嘴压掉后再将拇指松开,避免液体回吸。
 
5.做好实验室的清洁消毒
操作台、移液器、离心机、PCR扩增仪等仪器设备应经常用10%次氯酸或 75%酒精、紫外线灯或臭氧消毒处理。 特别是实验完成后,应立即清洁工作台,并进行消毒。
 
6.做好实验防护
使用不含荧光物质的一次性手套、一次性专用离心管、自卸式移液器和带滤嘴吸头。选择质量好的离心管,以避免样本外溢和外来核酸的进入,打开离心管前应先离心,将管壁及管盖上的液体甩至管底部,以防止管内液体溅出,造成污染。反应管中尽量避免气泡存在,管盖应盖紧。试剂准备和标本处理应使用超净工作台或防污染罩,以防止对环境污染。
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