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PCR实验室已成为当前的迫切需要

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PCR实验室已成为当前的迫切需要

2019/05/08 08:52
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【摘要】:
如何设计一个合格的PCR实验室?对于临床PCR实验室的分区及其设备配置,卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号)中做了明确规定。并且卫生临床检验中心发出的配套文件《临床基因扩增检验实验室工作规范》(卫检字 [2002]8号)又对各区的功能及注意事项做了简单描述。
 
PCR(聚合酶链式反应)实验室又叫基因扩增实验室 ,已成为我国临床实验室非常重要的一个检查科室。设计和建立符合我国相关标准的临床定量PCR实验室已成为当前的迫切需要。
 
如何设计一个合格的PCR实验室?对于临床PCR实验室的分区及其设备配置,卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号)中做了明确规定。并且卫生临床检验中心发出的配套文件《临床基因扩增检验实验室工作规范》(卫检字 [2002]8号)又对各区的功能及注意事项做了简单描述。
 
设计一个合格的PCR实验室首先要做到“严格分区”。临床基因扩增检验实验室区域设置原则把它分为试剂储存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配置和扩增区、扩增产物分析区。一般来说试剂准备区是PCR实验室中“洁净”的区域,它不应有任何核酸成分的存在,否则将严重影响检测结果的准确性。它包括试剂中所带的标准品和阳性对照。这些试剂及核酸提取试剂均应放在标本制备区。标本制备区往往是首先进入的工作区域,该区域应限定只有本区的工作人员进入。同样仪器设备,工作服及各种物品都须专用。为了防止气溶胶的扩散,标本的制备应在生物安全柜内进行。扩增反应体系的配置和核酸的提取加入要在扩增区内进行,以上三区的设立均需设立缓冲间。产物分析区是临床基因扩增检验的一个工作区域,由于本工作区域应设置为负压状态,空气流向为由外向内,以防止扩增产物的气溶胶的流出,故本区可无缓冲间。
 
另外,不同的工作区域使用不同的工作服(例如用不同的颜色划分)。工作人员离开工作区域时,不得将工作服带出。各个工作区域须有明确的标记,避免不同工作区域的设备、物品混用。进入各工作区域须严格按照单一方向进行。即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配置和扩增区→扩增产物分析区。通过对 PCR 实验室的严格分区,就可以尽量减少假阳性结果的出现,确保了检测结果的准确性,更避免了不必要的医疗纠纷。
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