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PCR实验室基本要求

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PCR实验室基本要求

2019/04/18 08:38
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【摘要】:
PCR实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域。只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,有上述前面三个区域即可。各区域应完全独立分隔,不应有任何的空气直通。
 
1.PCR实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域。只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,有上述前面三个区域即可。各区域应完全独立分隔,不应有任何的空气直通。
 
2.标准的PCR实验室产物分析区或三个区域的后一个区域(即扩增及产物分析区),空气流向应由室外向室内,可通过在室内设置通风橱、排风扇或其他排风系统达到空气流由室外向空内流动的要求。
 
3.PCR实验室各区域仪器设备配备通常如下:
3.1 标准的PCR实验室试剂准备区
仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等。可使用超净工作台作为试剂配制操作台面。
 
3.2 标准的PCR实验室标本制备区
仪器设备主要应有生物安全柜,为B2,可避免提取核酸在柜内反复循环,造成标本间交叉“污染”,出现假阳性结果。此外还应配备加样器、台式高速离心机(冷冻及常温)、台式低速离心机、恒温设备(水浴和/或干浴仪)、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。 
 
3.3 标准的PCR实验室扩增区
主要仪器就是核酸扩增热循环仪(PCR仪,实时荧光或普通的)。热循环仪的电源应专用,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响。此外,根据工作需要,还可配备加样器、超净台等。
 
3.4 标准的PCR实验室产物分析区
本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪和洗板机等。
在理想情况下,PCR实验室试剂准备、标木制备、扩增三个区域可设置缓冲间。在缓冲间内,可设置正压,使空内空气不流向室外,室外空气不流向室内。
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